腺病毒型PCR試劑盒的PCR反應(yīng)體系配制
點(diǎn)擊次數(shù)：1039 更新時(shí)間：2020-05-21
腺病毒型PCR試劑盒的PCR反應(yīng)體系配制：
注：使用前務(wù)必充分混勻，避免劇烈震蕩產(chǎn)生過多氣泡。
a）模板使用量：進(jìn)行基因組上的目的片段檢測，建議使用少量的血液量作為模板；檢測血液樣本中某種病毒或細(xì)菌等的目的片段，建議擴(kuò)大PCR體系并使用較大量的血液模板。血液模板zui多占PCR體系的45%（人血）、20%（鼠血）。若模板使用含有血液的采集卡，可截取直徑1-4 mm的血點(diǎn)，直接加入20-50 μL PCR反應(yīng)體系進(jìn)行擴(kuò)增。
b）引物濃度：通常引物終濃度為0.2 μM，也可以根據(jù)情況在0.1-0.5 μM之間進(jìn)行調(diào)整。
c）反應(yīng)體系：使用20 μL或 50 μL，以保證目的基因擴(kuò)增的有效性和重復(fù)性。
d）體系配制：配制好PCR反應(yīng)體系，置于渦旋儀上渦旋混勻，瞬時(shí)離心將反應(yīng)液集于管底。
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