細(xì)胞名稱 犬蝠皮膚細(xì)胞;GSnFBS1
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞來源于一雄性犬蝠的皮膚組織。中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫于2005年建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P2
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
犬蝠皮膚細(xì)胞;GSnFBS1 | 貼壁生長 | EY-X63725 |
?
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Naringenin 7-O-β-D-glucuronide methyl ester
CAS No.:1985597-72-5
中文名:柚皮素-7-O-β-D-葡萄糖醛甲酯
分子式:C22H22O11
黃花敗醬甙C;牡丹草苷B 訂購|咨詢 淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1(APLP1) 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg
基辛弗林 訂購|咨詢 淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1(APLP1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
地榆皂苷II 訂購|咨詢 淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2(APLP2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
茯苓 訂購|咨詢 淀粉樣蛋白β前體蛋白結(jié)合蛋白2(APPBP2) 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg
山梔苷酯 訂購|咨詢 淀粉樣蛋白β前體蛋白結(jié)合蛋白B3(APBB3) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
環(huán)氧澤瀉 訂購|咨詢 α(Amyα) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
異李素3O新 訂購|咨詢 β(Amyβ) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
訂購|咨詢 γ(Amyγ) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
10脫巴卡亭 訂購|咨詢 滲出性玻璃體視網(wǎng)膜病變基因2(EVR2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
高三尖杉酯 訂購|咨詢 滲透性糖蛋白(Pgp) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
人參皂苷Rh3 訂購|咨詢 滲透性糖蛋白(Pgp) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
積雪草 訂購|咨詢 密封蛋白(OCLN) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
羊藿苷 訂購|咨詢 密封蛋白(OCLN) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
軟骨素 訂購|咨詢 密封蛋白(OCLN) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
阿魏 訂購|咨詢 彈性蛋白(ELN) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
尾草 訂購|咨詢 彈性蛋白(ELN) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
維生素C 訂購|咨詢 彈性蛋白(ELN) 規(guī)格: 20mg
蝙蝠葛諾林(96%) 訂購|咨詢 彈性蛋白微原纖維界面因子1(EMILIN1) 規(guī)格: 10mg
ALR 肝再生增強(qiáng)因子抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Rosiglitazone HCL
Insulin Receptor R 胰島素受體相關(guān)受體抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Solamargine
Islet 1 胰島素基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Solasonine
Lipin 1 脂酯酶LPIN1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Angoroside C
APTNAP/ALPL 性酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Toremifene
PGC1 beta 過氧物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Toremifene
PGC1 alpha + beta 過氧物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1α+β抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Neratinib(HKI272)
SERPINA12/Vaspin 內(nèi)臟脂肪組織源性絲蛋白酶抑制蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Methyl Protodioscin
苦參 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Ammothamnine 含量:BR,98%
鋁G 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:AluminumoxideG 含量:AR,98%
鋁H 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:AluminumoxideH 含量:USP級
酶 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:XOD 含量:高層析純,12ku/mg;液體
錳(Ⅳ) 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Manganesedioxide 含量:AR,98%
鉬(VI) 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Molybdicanhydride 含量:CP,54%
硼 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Boronoxide 含量:BR,96%
鋱 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Tetraterbiumheptaoxide 含量:CP,97.5%
銅 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Cupricoxide 含量:AR,99%
鎢 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Tungsten(VI)oxide 含量:4N,0.2㎜
犬蝠皮膚細(xì)胞;GSnFBS1葡萄糖天門冬素培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:葡萄糖天門冬素培養(yǎng)基
麥康凱瓊脂3號規(guī)格:250g用途:用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(yǎng)
結(jié)晶紫規(guī)格:25g用途:微生物指示劑
酚紅煌綠瓊脂規(guī)格:250g用途:用于飼料中沙門氏菌分離培養(yǎng)
苦杏仁甙規(guī)格:20支詳情介紹
L型細(xì)菌高滲鹽增菌培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于L型細(xì)菌增菌培養(yǎng)