公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
豬腎細胞;PK(15) | 貼壁生長 | EY-X63856 |
細胞名稱 豬腎細胞;PK(15)
形態(tài)特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞PCV陽性。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:2~1:4傳代,每周換液2~3次
傳代情況: C2
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
成纖維細胞生長因子受體3檢測試劑盒細胞名稱: 社鼠肌肉成纖維樣細胞;CWBRT11形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Fibroblast Growth Factor Receptor-3
細胞角蛋白5;6檢測試劑盒細胞名稱: 大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Cytokeratin5;6
6前列腺素12檢測試劑盒細胞名稱: 樹鼩胎皮膚成纖維樣細胞;TS-ES-1形態(tài)特性: 成纖維細胞樣6-keto-prostaglandin F12
天麻抗真菌蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-2形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Gastrodia Antifungal Protein
游離尿檢測試劑盒細胞名稱: 婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-3形態(tài)特性: 成纖維細胞樣free Uric acid
血小板衍生生長因子可溶性受體α檢測試劑盒細胞名稱: 大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-5形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Platelet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α
尿鎘-金屬硫蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-4形態(tài)特性: 成纖維細胞樣urine cadmium Metallothionein
丙氨氨基肽酶檢測試劑盒細胞名稱: 大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-6形態(tài)特性: 成纖維細胞樣alanineaminopeptidase
白細胞分化抗原CD109檢測試劑盒細胞名稱: 山羊腎上皮樣細胞;DG-K1形態(tài)特性: 上皮樣CD109 antigen
Igκ鏈V-I區(qū)HK102檢測試劑盒細胞名稱: 山羊皮膚成纖維樣細胞;DG-S1形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Ig kappa chain V-I region HK102
凝膠溶素檢測試劑盒細胞名稱: 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S2形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Gelsolin
受體相互作用蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S3形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Receptor interacting Protein
CXC趨化因子受體7檢測試劑盒細胞名稱: 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S4形態(tài)特性: 成纖維細胞樣CXC-chemokine receptor 7
14-3-3蛋白beta檢測試劑盒細胞名稱: 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S5形態(tài)特性: 成纖維細胞樣14-3-3 protein beta
14-3-3蛋白gamma檢測試劑盒細胞名稱: 水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S1形態(tài)特性: 成纖維細胞樣14-3-3 protein gamma
14-3-3epsilon檢測試劑盒細胞名稱: EB病轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;HH-29形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣14-3-3epsilon
14-3-3theta檢測試劑盒細胞名稱: EB病轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;HH-16形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣14-3-3theta
豬腎細胞;PK(15)柴胡皂苷B中文別名:柴胡皂甙B
英文名:Saikosaponin B
CAS登錄號:新品待定
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色粉末
規(guī)格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:傘形科植物阿爾泰柴胡Bupleurum krylovianum Schischk.ex Kryl.
溶解性:可溶于水,不溶于等有機溶劑。
藥理藥效:抗炎、抗病、抗腫瘤。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。