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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細(xì)胞>>轉(zhuǎn)化細(xì)胞>>肺鱗癌細(xì)胞;LTEP-s
 
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產(chǎn)品名稱(chēng):
肺鱗癌細(xì)胞;LTEP-s
產(chǎn)品型號(hào):
產(chǎn)品報(bào)價(jià):
產(chǎn)品特點(diǎn):
肺鱗癌細(xì)胞;LTEP-s相關(guān)產(chǎn)品:
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  肺鱗癌細(xì)胞;LTEP-s的詳細(xì)資料:

公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱(chēng)

生長(zhǎng)特性

貨號(hào)

肺鱗癌細(xì)胞;LTEP-s

貼壁生長(zhǎng)

EY-X63432

細(xì)胞名稱(chēng)  肺鱗癌細(xì)胞;LTEP-s
形態(tài)特性: 多邊形上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)

特征特性: 1978年建系,人肺低分化鱗癌,原代細(xì)胞消化,3日細(xì)胞開(kāi)始生長(zhǎng),組織塊法2周開(kāi)始生長(zhǎng),*傳代23日;免疫缺陷小鼠體內(nèi)可以形成實(shí)體瘤。STR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞與人肺癌細(xì)胞LTEP-a1為同一遺傳背景,還有存在細(xì)胞間的交叉污染。

培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

傳代方法:

傳代情況: P56

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè): 培養(yǎng)法(-)
?
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
TGF-b1 MAb (Cl 141322) (500 UG)細(xì)胞名稱(chēng): 內(nèi)膜腺癌細(xì)胞;HEC-1-B[HEC-1B;HEC1B] MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS;1%NEAA+1mM丙銅鈉

TGF-b1 Fluor MAb (Cl 9016) (100 TESTS)細(xì)胞名稱(chēng): 小鼠肝癌細(xì)胞;Hepa1-6[Hepa1-6] DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

TGF-b1 Biot Aff Pur PAb (50 UG)細(xì)胞名稱(chēng): 癌細(xì)胞;SK-BR-3 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

TGF-b1 APC MAb (Cl 9016) (100 TESTS)細(xì)胞名稱(chēng): 胚肺成纖維細(xì)胞;CCC-HPF-1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

Testosterone SixPak (1 PK)細(xì)胞名稱(chēng): 豬腎細(xì)胞;LLC-PK1 M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)3%FBS

Testosterone Assay Kit (1 KT)細(xì)胞名稱(chēng): 大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞;IEC-6 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)5%FBS;0.01mg/mlInsulin

TdT InSitu Apop Replenisher (30 TESTS)細(xì)胞名稱(chēng): 胚皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-ESF-1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

TdT InSitu Apop Det-FKit (30 TESTS)細(xì)胞名稱(chēng): 結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HT-29 DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)5%FBS

Tdt InSitu Apop Det-Core Reag (30 TESTS)細(xì)胞名稱(chēng): 巨細(xì)胞白血病細(xì)胞株;Mo7e RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;8ng/mlrHuGM-csf;10%CO2

TdT InSitu Apop Det Kit-DAB (30 TESTS)細(xì)胞名稱(chēng): 非小細(xì)胞肺腺癌細(xì)胞;NCI-H157 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;10mMHepes+1mM丙銅鈉

TdT Enzyme/Buffer (1000 UN)細(xì)胞名稱(chēng): 小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞;P815 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;4mMglutamine

TdT dNTP Mix (30 UL)細(xì)胞名稱(chēng): 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞;CHO DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

TdT Apop Det Kit-TACS Blue (30 TESTS)細(xì)胞名稱(chēng): 昆蟲(chóng)卵巢細(xì)胞;SF9 Grace'sInsectMedium(GIMw/oBSA,FCS,WholeEggUltrafiltrate)10%FBS

Tau MAb (Cl 376720) (100 UG)細(xì)胞名稱(chēng): 前列腺癌細(xì)胞;PC-3[PC3] F12K10%FBS

Tau Aff Pur PAb (100 UG)細(xì)胞名稱(chēng): 紅系白血病細(xì)胞;TF-1 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS;4mMglutamine;6-8ng/mlGM-CSF

TACS-XL - TACS Blue (30 TESTS)細(xì)胞名稱(chēng): 導(dǎo)管瘤細(xì)胞;UACC812 L15:LeibovitzMedium10%FBS
肺鱗癌細(xì)胞;LTEP-s豬血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒IL-27ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

豬血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒IL-2ELISAkit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

豬血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒IL-2ELISAkit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

豬胰島素(INS)ELISA試劑盒IL-2ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

豬胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒IL-2ELISAkit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

豬胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒IL-2ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISA試劑盒IL-2ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。

豬載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒IL-2ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 肺鱗癌細(xì)胞 LTEP-s
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