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小鼠正常肝細胞;NCTC1469NCTC1469
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小鼠正常肝細胞;NCTC1469[NCTC1469]相關產品:洋蔥伯克氏菌PCR試劑盒實驗
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  小鼠正常肝細胞;NCTC1469NCTC1469的詳細資料:

公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:

產品名稱

生長特性

貨號

小鼠正常肝細胞;NCTC1469[NCTC1469]

貼壁生長

EY-X63443

細胞名稱  小鼠正常肝細胞;NCTC1469[NCTC1469]
形態(tài)特性: 上皮樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 1952年建系,源于正常C3H/An小鼠的肝臟組織,表達H-2K抗原,鼠痘病毒陰性。

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%HS

傳代方法: 1:2~1:4傳代,每周換液3次。

傳代情況: C3

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
rROBO1 MAb (Cl 243716) (500 UG)細胞名稱: BALB/C小鼠肝上皮細胞;BNL1MEA.7R.1 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

rROBO1 MAb (Cl 243706) (500 UG)細胞名稱: 人鱗癌細胞(高分化);HCC-94[HCC941122;HCC94] RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rROBO1 DuoSet Econ Pack (1 PK)細胞名稱: 小鼠畸胎瘤細胞;F9 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

rROBO1 DuoSet (1 KT)細胞名稱: 人膽管細胞型肝癌細胞;HCCC-9810 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rROBO1 Biot Aff Pur PAb (50 UG)細胞名稱: 人胃癌細胞;HGC-27 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rROB01 Aff Pur PAb (100 UG)細胞名稱: 人卵巢癌細胞;HO-8910 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrNXPH3, CF (50 UG)細胞名稱: 人高轉移卵巢癌細胞;HO-8910PM RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrNXPH1, CF (50 UG)細胞名稱: 人肺鱗癌細胞;LTEP-s RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrNRXN1a, CF (50 UG)細胞名稱: 人腎上腺神經母細胞瘤細胞(腦轉移);KP-N-NS RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrNpn-1/Fc, CF (25 UG)細胞名稱: 小鼠網織細胞肉瘤;M5076 RPMI1640(w/oHepes)15%HS

rrNpn-1/Fc (NS0), CF (25 UG)細胞名稱: 人神經母細胞瘤細胞;IMR-32 MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

rrNotch-2, CF (50 UG)細胞名稱: 人小細胞肺癌細胞;LTEP-sm RPMI1640(w/oHepes)10%FBS

rrNotch-1/Fc, CF (50 UG)細胞名稱: 牛腎細胞;MDBK MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

rrNogo-A/Fc, CF (50 UG)細胞名稱: 人腎上腺腺瘤細胞;NCI-H295 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

rrNogo-A/Fc (aa 1026-1090), CF (50 UG)細胞名稱: 小鼠神經母細胞瘤細胞;Neuro-2a[N2a;Neuro-2a] MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

rrNLGN1, CF細胞名稱: 人腎癌細胞;OS-RC-2 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
小鼠正常肝細胞;NCTC1469[NCTC1469]人二磷腺苷(ADP)ELISA試劑盒INSELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

人泛素連接酶(E3/UBPL)ELISA試劑盒iNVELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

人分泌成分(SC)ELISA試劑盒IP-10ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒IP-10ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

人泛素分解酶(DUB)ELISA試劑盒IP-10ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

S轉移酶(GSTs)ELISA試劑盒i-PTHELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

人硫轉移酶pi基因(GSTpi)ELISA試劑盒i-PTHELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

人花生四烯(AA)ELISA試劑盒i-PTHELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產品相關關鍵字: 小鼠正常肝細胞 NCTC1469[NCTC1469]
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