綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測(cè);
(6)取液儲(chǔ)存;通過(guò)該綜合微生物培養(yǎng)方法簡(jiǎn)單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類(lèi)穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
腸膜明串珠菌說(shuō)明書(shū) | Leuconosto | EY-J963556 |
資源名稱: 腸膜明串珠菌
種屬: Leuconostoc mesenteroides
提供形式: 凍干物
安全等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生右旋糖酐,做臨床輸液用
培養(yǎng)基: MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,鎂 0.2 g,乙酸鈉 5.0 g,檸檬酸三銨 2.0 g,二氫鉀氫二鉀 2.0 g,錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾水 1000mL。pH6.2±0.2。121℃,15mim。
生長(zhǎng)條件: 25℃,兼性厭氧,2-3天
存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡(jiǎn)單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過(guò)1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長(zhǎng)穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲(chóng)、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營(yíng)養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無(wú)機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過(guò)0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營(yíng)養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營(yíng)養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類(lèi)培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶?jī)杉?jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長(zhǎng)。原則上各種營(yíng)養(yǎng)成分不宜過(guò)濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過(guò)程,因菌種不同而異,一般可分為一級(jí)種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級(jí)種子,把一級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將一級(jí)種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過(guò)培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱為四級(jí)發(fā)酵。
Streptomyces│olivoreticuli 中文名稱:橄欖網(wǎng)狀鏈霉菌Streptomyces│olivoreticuli提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生Viomycin紫霉素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0012生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:95%
Micromonospora│chersina 中文名稱:旱地單孢菌Micromonospora│chersina提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:95%
Streptomyces│ostreogriseus var.kangdinensis 中文名稱:礪灰鏈霉菌康定變種Streptomyces│ostreogriseus var.kangdinensis提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生Virginiamycin維基尼亞霉素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0012生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:95%
Actinomadura│viridoflava var. fujianensis nov. var.1991 中文名稱:綠黃馬杜拉放線菌福建新變種Actinomadura│viridoflava var. fujianensis nov. var.1991分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗真菌;抗白色念珠菌;抗新型隱球菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0038生長(zhǎng)條件:25-32C存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥 純度:90%
Chaetophoma│sp. 中文名稱:毛莖點(diǎn)霉屬菌種Chaetophoma│sp.分離基物:一品紅葉提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:藥用植物內(nèi)生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0138生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié) 純度:90%
Paecilomyces│sp. 中文名稱:擬青霉菌屬菌種Paecilomyces│sp.分離基物:土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:抗耐藥細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0027生長(zhǎng)條件:28C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:98%
Alrnaria│arborescens 中文名稱:?jiǎn)棠炬湼矜逜lrnaria│arborescens分離基物:莖提供形式:凍結(jié)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長(zhǎng)條件:25C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié);礦物油法 純度:98%
Penicillium│sp. 中文名稱:青霉屬菌Penicillium│sp.分離基物:枯枝枯葉提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)生真菌素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:CM0014生長(zhǎng)條件:26C存儲(chǔ)條件:-80℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥 純度:97%
腸膜明串珠菌說(shuō)明書(shū)Inhibin beta B 抑制素βB抗體五指毛桃腺苷-5′-二磷 鹽Human TNNT1 (Troponin T Type 1, Slow Skeletal) ELISA Kit
Inhibin Beta C 抑制素βC抗體鹿角(馬鹿)腺苷-5′-二磷 鹽Human TNPO2 (Transportin 2) ELISA Kit
Insulin 胰島素抗體溪黃草(淺紋香茶菜)3-苯乙烯Human UCP-2 (Uncoupling Protein 2, Mitochondrial) ELISA Kit
Insulin (pig) 胰島素抗體 (豬)土鱉蟲(chóng)(冀地鱉)3-苯乙烯Human HLTF (Helicase Like Tranion Factor) ELISA Kit
rInsulin 抗抗體牡丹皮3-溴苯乙烯Human UPP2 (Uridine Phosphorylase 2) ELISA Kit
rInsulin monoclonal (pig) 抗胰島素單克隆抗體(豬)花生紅衣3-溴苯乙烯Human MT1 (Metallothionein 1) ELISA Kit
rInsulin human monoclonal 單克隆抗體預(yù)知子(三葉木通)2-苯乙烯Human MT2 (Metallothionein 2) ELISA Kit
Insulin Receptor 胰島素受體抗體全葉青蘭2-苯乙烯Human TJP1 (Tight junction protein ZO-1) ELISA Kit